紫外檢測器的相關(guān)知識點普及
紫外檢測器是目前應(yīng)用較為廣泛的一種檢測器,這種檢測器靈敏度高,線性范圍寬,對流速和溫度變化不敏感,可用于梯度洗脫分離。要求被檢樣品組分在紫外或可見光區(qū)有吸收,而使用的流動相無紫外吸收或紫外吸收波長與被檢組分紫外吸收波長不同,在被檢組分紫外吸收波長處沒有吸收。屬選擇性檢測器,同時它是非破壞性檢測器??梢赃x擇樣品的大吸收波長作為檢測波長,提高檢測靈敏度;也可選擇對溶質(zhì)有強吸收而基質(zhì)無吸收的波長下進(jìn)行檢測,有效提高分析的選擇性。梯度洗脫時,選擇在流動相改變而其吸光度不變的波長下進(jìn)行檢測,有利于建立高效、快速、穩(wěn)定的分析方法。
主要由光源、分光系統(tǒng)、檢測池和檢測系統(tǒng)四大部分組成,從光源分光系統(tǒng)得到的特定波長的單色光通過檢測池時,一部分光被溶液中的吸光性溶質(zhì)吸收,剩余的透射光到達(dá)檢測系統(tǒng)后光信號轉(zhuǎn)換成電信號,再經(jīng)過電子線路放大等步驟,得到與待測吸光物質(zhì)濃度成正相關(guān)的輸出信號。
它是基于溶質(zhì)分子吸收紫外光的原理設(shè)計的檢測器,紫外檢測器的工作原理是當(dāng)一束單色光透過流動池時,若流動相不吸收光,則吸收度A與吸光組分的濃度C和流動池的光徑長度L成正比。物理上測得物質(zhì)的透光率,然后取負(fù)對數(shù)得到吸收度。大部分常見有機物質(zhì)和部分無機物質(zhì)都具有紫外或可見光吸收基團(tuán),因而有較強的紫外或可見光吸收能力,因此既有較高的靈敏度,也有很廣泛的應(yīng)用范圍,是液相色譜中應(yīng)用較廣泛的檢測器。
為得到高的靈敏度,常選擇被測物質(zhì)能產(chǎn)生較大吸收的波長作檢測波長,但為了選擇性或其它目的也可適當(dāng)犧牲靈敏度而選擇吸收稍弱的波長,另外,應(yīng)盡可能選擇在檢測波長下沒有背景吸收的流動相。紫外檢測器的波長范圍是根據(jù)連續(xù)光源(氘燈)發(fā)出的光,通過狹縫、透鏡、光柵、反射鏡等光路組件形成單一波長的平行光束。通過光柵的調(diào)節(jié)可得到不同波長。波長范圍應(yīng)該是根據(jù)光源來確定的,不同光源波長范圍也不一樣。